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人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒

人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒
elisa檢測試劑盒不需要任何分離步驟,操作十分簡便、快速,數分鐘便能得出結果,酶免疫測定方法操作時,所有反應試劑均在同一體系內進行,自主研發和銷售多年,對ELISA試劑盒這方面的研究越來越專業,小至成本,大至數據,幫助許多科研人士完成實驗。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2023-02-21
  • 訪  問  量:523
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產品詳情
品牌其他品牌貨號RQ-FW0354A
規格96T/48T供貨周期現貨
主要用途科研試驗品牌瑞清
方法競爭法、夾心法、間接法檢測樣本血清.血漿.組織.相關液體等
檢測種屬人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細胞,土壤等動植物產品優勢靈敏性高特異性強

人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒



檢測原理

試劑盒采用雙抗原一-步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 。往預先包被病毒性腹瀉病毒ti的包被微孔中,依次加入標本、HRP標記的檢測抗原,經過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在suan的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450NM波長下測定吸光度(OD) ,與CUTOFF值相比較,從而判定標本中豬病毒性腹瀉病毒(BVDV) 的存在與否。

樣品收集、處理及保存方法

1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.血漿: EDTA、檸檬suan鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.細胞上清液: 3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉 離心10分鐘取上清。

5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按次用量分裝,凍存于-20°C, 避免反

復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


自備物品

1.酶標儀(450NM)

2.高精度加樣器及槍頭: 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37恒溫箱

操作注意事項

1.試劑盒保存在2-8°C,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶完quan溶解后再使用。

2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.預處理后的樣本請按照操作步驟用樣ben稀釋ye適當稀釋以達到試劑盒的的jia檢測效果。.

4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.所有液體組分使用前充分搖勻。

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人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒

常用方法:

1. 夾心法:

夾心法常用于檢測大分子抗原,一般的操作步驟為:

a. 將具有專一性的ti固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余ti

b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的ti進行專一性鍵結

c. 洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次ti,與待測抗原進行鍵結

d. 洗去多余未鍵結一次ti,加入帶有酶的二次ti,與一次ti鍵結

e. 洗去多余未鍵結二次ti,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結果

原理:針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆ti分別作為固相ti和酶標ti,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物。

2. 間接法

間接法常用于檢測ti,一般的操作步驟為:

a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次ti,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。

c. 洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次ti,與待測的一次ti鍵結。

d. 洗去多余未鍵結二次ti,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產物的含量即可測量待測ti的含量。

原理:利用酶標記的抗ti以檢測已與固相結合的受檢ti。


3. 競爭法

競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:

a. 將具有專一性的ti固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余ti

b. 加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的ti進行專一性鍵結

c. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的ti進行專一性鍵結,由于塑膠孔盤上固著的ti數量有限,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結的固著ti就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上ti鍵結,即所謂競爭法之由來。

d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。

e. 當需要偵測無法獲得兩種以上單一性ti的抗原,或是不易得到足夠的純化ti以固著于孔盤上時,一般會考慮使用競爭法ELISA。

標本要求 :

1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控

制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于

標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍) 后再測定,計算時請

后乘以總稀釋倍數(xnx5)

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

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